傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和生長密度，當細胞生長密度達到80%~90%時，即可進行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據培養(yǎng)瓶大小向瓶內加入適量含EDTA的，一般應覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進行觀察，當發(fā)現有70%~80%細胞收縮變圓、細胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細胞懸液至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細胞，輕輕吹打混勻，使細胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

（8）根據細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進行細胞凍存。

小鼠肺成纖維細胞（永生化）

細胞基本屬性：

細胞詳細介紹：

二、懸浮細胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實驗室中懸浮細胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細胞碎片的情況下）。當在顯微鏡下觀察到懸浮細胞已經長滿至80%~90%（細胞懸液變黃）時，即可進行傳代。

（1）嚴格進行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預實驗的方法選擇適當的培養(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細胞生存，促進細胞生長起著關鍵作用。可根據文獻或預實驗選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應保持用至實驗完成。

（4）消化細胞時應避免消化時間過短導致消化不收集到的細胞數量少，或消化時間過長導致細胞成團塊樣絮狀游離，這時的細胞已有損傷或死亡，影響細胞數量和實驗進度。

（5）細胞離心的時候應避免離心力過小收集的細胞數量不夠，或離心力過大對細胞產生損傷。離心后的細胞沉淀棄去上清后，應先彈散細胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打對細胞損傷小，可以提高細胞活率。

（6）吹打細胞時應盡量避免細胞的產生，以免損傷細胞，影響細胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內可以減少氣泡的產生）。

公司正在出售的產品：

ELISA 小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4) 48T/96T 進口分裝

Mouse S100 protein (S-100) ELISA Kit 小鼠S100蛋白(S-100)ELISA試劑盒

CLIAKitforLAP(HumanLeucineaminopepridase)ELISAKit人亮氨酰氨基肽酶規(guī)格：48T/96T

通用型WNV(WESTNILE)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次

ELISAKitC4鮭魚補體蛋白4規(guī)格：48T/96T

小鼠細胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)免疫試劑盒 Mouse iercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit

埃博拉病毒(EBOV)檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

humanserumdeprivatioesponse,SDPRELISA試劑盒人血清剝奪反應相關蛋白(SDPR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ELISAKitSmad1小鼠信號轉導分子規(guī)格：48T/96T

HumanCarbohydrateaigen19-9,CA19-9ELISAKit人糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

大鼠血紅素氧合酶2(HO2)ELISA試劑盒 ，英文名： HO2 ELISA Kit

Fish gonadoopin-releasing hormone (GH) ELISA Kit 魚類促性釋放激素(GH)ELISA試劑盒

Mousetumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand4,AILR4ELISAKit 小鼠腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體4(AIL-R4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanCenomereProtein,CENP-BELISAKit人著絲粒蛋白B規(guī)格：48T/96T

細胞CLK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

腫瘤抑制基因LATS2抗體

果糖-2,6-二磷酸酶2/磷酸果糖激酶2抗體

乳腺癌膜蛋白11/前梯度同源蛋白3抗體

Myoferlin抗體

線粒體核糖體蛋白L27抗體

白細胞樣受體6抗體

磷酸化TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗體

c-fos單克隆抗體

小鼠肺成纖維細胞（永生化）堿型乙酰受體AChRα1抗體